Eine in vitro Flow-Untersuchung der Wirkung von Stromazellen auf die Rekrutierung von Leukozyten

Nehmen wir vormontierte Strömungskammern, die mit Durchflusssystemen mit Transwell-Filtern verbunden sind: Eine mit einer endothelialen Monokultur oben, die andere mit einer Endothelkultur oben und Stromazellen unten.

Beide Kammern sind mit einem proinflammatorischen Zytokin vorbehandelt.

In einer Monokultur aktivieren Zytokine Endothelzellen und regulieren die Expression von Adhäsionsmolekülen hoch.

Die Wechselwirkung zwischen Stroma- und Endothelzellen in der Co-Kultur führt jedoch dazu, dass Stromazellen regulatorische Mediatoren produzieren, die die Reaktion der Endothelzellen auf entzündungsfördernde Zytokine herunterregulieren.

Positionieren Sie die Kammer auf einem inversen Phasenkontrast-Mikroskoptisch.

Führen Sie eine neutrophile Suspension ein.

Neutrophile werden rekrutiert und binden über transiente adhäsive Wechselwirkungen an die endothelialen Adhäsionsmoleküle, was ihre Interaktion mit oberflächengebundenen Chemokinen erleichtert und entlang des Endothels rollt.

Diese Interaktion aktiviert die Integrine auf den Neutrophilen, stabilisiert die Adhäsion und führt zu einer Transmigration durch die Endothelzellen.

In der Kokultur führt die herunterregulierte endotheliale R