Ein Festphasen-Adhärenz-Assay zur Beurteilung der Biofilmbildung
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Immunologie
0 Aufrufe • 4:07 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Multi-Well-Platte mit flachem Boden mit Vertiefungen, die Bakterien in Wachstumsmedien oder Bakterien in Wachstumsmedien enthalten, die mit Gallensalz ergänzt sind.
Die Gallensalze induzieren Stress, verursachen Zellschäden und setzen DNA und Proteine frei. Diese Biomoleküle beschichten die Vertiefungsböden und ermöglichen es den überlebenden Bakterien, an der festen Oberfläche zu haften.
Die angehefteten Bakterien vermehren sich, bilden Mikrokolonien und produzieren Autoinduktoren – oder chemische Signalmoleküle, die die bakterielle Kommunikation ermöglichen.
Diese Kommunikation veranlasst Bakterien, sich anzusiedeln und die Produktion von extrazellulären polymeren Substanzen (EPS) zu initiieren, wodurch ein Biofilm entsteht.
Entfernen Sie nach der Inkubation das Medium, um frei schwebende Bakterien zu beseitigen.
Führen Sie eine kristallviolette Färbung ein, die mit dem Peptidoglycan der bakteriellen Zellwand interagiert und ihr eine violette Farbe verleiht.
Überschüssige Flecken entfernen und trocknen. Mit Ethanol überziehen, um Kristallviolett von der bakteriellen Zellwand zu lösen und die Farbe der Lösung zu ändern.
Eine intensivere Färbung in mit Gallensalz be
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