JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:49 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte, die einen bakteriellen Biofilm enthält – Bakterien, die in der schützenden extrazellulären Polymersubstanz (EPS) eingekapselt sind.
Saugen Sie das Medium an, um nicht anhaftende Bakterien zu entfernen, und waschen Sie es.
Behandeln Sie Biofilm-haltige Vertiefungen entweder mit Puffer allein, Puffer mit Glukose, Puffer mit Gallensalzen oder Puffer mit Glukose und Gallensalzen.
Puffer- und Glukosebehandlungen unterstützen die Freisetzung bakterieller Enzyme, die das EPS des Biofilms abbauen.
Dies hat zur Folge, dass der Biofilm abgebaut wird und die Bakterien freigesetzt werden.
Während Gallensalze und eine Kombination aus Gallensalzen und Glukosebehandlungen Stressbedingungen nachahmen und Bakterien im schützenden EPS halten.
Den Überstand aus jeder Vertiefung auf eine frische Multi-Well-Platte geben.
Verdünnte Überstände auf Agarplatten auftülpen und inkubieren.
Zählen Sie die Bakterienkolonien auf und bestimmen Sie die bakterielle Ausbreitung für jede Behandlung.
Eine höhere Dispersion bei Puffer- und Glukosebehandlungen im Vergleich zu Gallensalzbehandlungen deutet auf den Abbau des Biofilms hin.
Zeichnen Sie die OD600-Werte von der Übern
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