JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:37 Min. • July 8th, 2025
Behandeln Sie neuronale Kulturen mit steigenden Konzentrationen eines Testtoxins.
Das Toxin gelangt in die Zellen und wird in das Zytosol abgegeben.
Abhängig von seinem Potenzial kann das Toxin die vesikuläre Fusion verhindern und die Freisetzung von Neurotransmittern hemmen.
Ersetzen Sie das Medium durch einen Puffer, der spezifische neuropharmakologische Verbindungen enthält, um neuronale Aktionspotentiale zu blockieren.
Stellen Sie die Kulturschale auf eine elektrophysiologische Bühne. Um die Aufzeichnung zu starten, verbinden Sie ein Neuronen-Soma mit einer Pipette, die eine Aufnahmeelektrode enthält.
Üben Sie einen konstanten Unterdruck aus, um einen kleinen Membranteil anzusaugen, wodurch ein Gigaseal entsteht, eine dichte Abdichtung, die minimale Interferenzen während der Aufnahme gewährleistet.
Halten Sie eine konstante Membranspannung aufrecht, um neuronale Ströme zu messen.
Wenden Sie Unterdruckimpulse an, um die Membran zu durchbrechen, und stellen Sie einen direkten Kontakt zwischen dem Neuron und der Pipette her.
Zeichnen Sie die Ströme auf, die im Neuron aufgrund der Aufnahme von Neurotransmittern, den sogenannten mEPSCs, erzeugt werden.
Eine Abnahme der mEPSC-Häufigk
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