JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 3:22 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Röhrchen, das separate Vektoren für die Gene der schwerkettigen und leichtkettigen Antikörper enthält.
Fügen Sie ein Transfektionsreagenz hinzu, um mit den Vektoren Komplexe zu bilden.
Übertragen Sie diese Mischung auf Säugetier-Wirtszellen und inkubieren Sie zur Internalisierung.
Fügen Sie ein Anti-Klumpen-Mittel hinzu, um die gleichmäßige Verteilung der transfizierten Zellen zu fördern und die Zellregeneration und das Zellwachstum zu verbessern.
Fügen Sie eine antibakterielle und antimykotische Lösung hinzu, um eine Kontamination zu verhindern.
Innerhalb der Wirtszelle integrieren sich die Vektoren in das Wirtsgenom.
Nach der Gentranskription verlassen einzelne mRNAs den Zellkern und durchlaufen eine Translation, um entstehende Antikörperketten zu bilden.
Durch richtiges Falten und Modifizieren der entstehenden Ketten entstehen schwere und leichte Ketten.
Diese Ketten verbinden sich zu voll funktionsfähigen Antikörpern, die dann in das extrazelluläre Medium abgegeben werden.
Ernte das Medium und zentrifugiere es. Filtern Sie den Überstand.
Das Filtrat wird durch eine Reinigungssäule geleitet, die eine selektive Bindung der Antikörper ermöglicht.
Mit einem E
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