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Immunologie
0 Aufrufe • 2:53 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir eukaryotische Expressionsvektoren, die entweder für eine Antikörper-Schwerkette oder eine Antikörper-Leichtkette kodieren, die von antigenspezifischen B-Zellen kloniert wurden.
Führen Sie Polyethylenimin ein, ein kationisches Polymer, das elektrostatisch mit den negativ geladenen Vektoren interagiert und Polyplexe bildet.
Inkubieren Sie Säugetierzellen mit den Polyplexen, die an den Zellen haften und über die Endozytose internalisiert werden. Die resultierenden Endosomen verschmelzen mit Lysosomen.
Die Polymere in den Polyplexen verursachen eine osmotische Schwellung des Vesikels, was zu dessen Bruch und Freisetzung der Vektoren führt.
Die freigesetzten Vektoren gelangen in den Zellkern und werden in schwer- und leichtkettige mRNA transkribiert, die über Ribosomen auf dem endoplasmatischen Retikulum transpliziert werden.
Die entstehenden Peptidketten lagern sich zu Antikörpern zusammen, die zum Golgi transportiert und in sekretorische Vesikel verpackt werden.
Bei der Fusion der sekretorischen Vesikel und der Zellmembran werden die Antikörper extrazellulär freigesetzt.
Ernten Sie den antikörperhaltigen Überstand für nachgeschaltete Assays.
Säen Sie einen Tag vor der Trans
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