Ein papierbasierter Immunoassay zum Nachweis von Immunglobulin G

Beginnen Sie mit den aminfunktionalisierten Filterpapierscheiben und tauchen Sie sie in Glutaraldehyd, ein Vernetzungsreagenz.

Glutaraldehyd reagiert mit den Amingruppen über eine Amin-Aldehyd-Reaktion.

Legen Sie die Scheiben in eine Röhre. Fügen Sie Wasser hinzu, schütteln Sie es und aspirieren Sie, um das restliche Glutaraldehyd zu entfernen.

Nach dem Trocknen die Immunglobulin-G-Fc-Fragment-spezifischen Fängerantikörper einführen. Amingruppen auf diesen Antikörpern interagieren mit Aldehydgruppen auf Papierscheiben und erleichtern deren kovalente Immobilisierung.

Waschen Sie, um ungebundene Antikörper zu entfernen, und führen Sie einen Blockierungspuffer ein, um eine unspezifische Bindung zu verhindern.

Geben Sie anschließend eine Testprobe, die Immunglobulin-G-Moleküle enthält, auf die Papierscheibe. Die Immunglobulin-G-Moleküle interagieren mit den Fängerantikörpern.

Overlay mit Meerrettichperoxidase-konjugierten IgG-Fc-Fragment-spezifischen Detektionsantikörpern, die mit dem vorgebundenen Immunglobulin G interagieren.

Waschen Sie, um ungebundene Antikörper zu entfernen, und fügen Sie eine Mischung aus chromogenem Substrat und Wasserstoffperoxid hinzu.

In Gegenwart von Wassers