JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 3:54 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Mikrotiterplatte, die den Pilz Candida tropicalis enthält.
Die Zellen sezernieren Sap2, ein proteolytisches Enzym, das ein Transmembran-Glykoprotein namens Msb2 spaltet und seine inhibitorische Domäne entfernt.
Dies führt dazu, dass der Pilz am Boden haftet und zu einer Mikrokolonie aus Hefe und fadenförmigen Formen heranwächst. Die Zellen sezernieren lösliche Bestandteile und Biopolymere und initiieren so die Bildung von Biofilmen.
Geben Sie eine Serumprobe mit Sap2-spezifischen Antikörpern in ausgewählte Vertiefungen und inkubieren Sie sie im Dunkeln.
Die Antikörper binden an Sap2 und neutralisieren dessen Aktivität, wodurch die Lebensfähigkeit der Zellen und die Reifung des Biofilms behindert werden.
In unbehandelten Vertiefungen reift der Biofilm zu einem dichten Netzwerk aus Zellen und extrazellulärer Matrix heran.
Saugen Sie die Flüssigkeit an, waschen Sie den Biofilm und trocknen Sie die Platte an der Luft. Fügen Sie ein chromogenes Substrat hinzu und inkubieren Sie im Dunkeln.
Lebensfähige Zellen, die membrangebundene Oxidoreduktasen verwenden, reduzieren das Substrat zu einem farbigen Produkt.
Übertragen Sie den farbigen Überstand und lesen Sie die Absorpti
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos