Eine In-vivo-Technik zur Verfolgung des bispezifischen Antikörper-induzierten T-Zell-Transports zu Tumoren
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:44 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir eine anästhesierte, immungeschwächte Maus, die ein subkutanes Tumor-Xenotransplantat trägt, das ein tumorassoziiertes Antigen oder TAA überexprimiert.
Retroorbital injizieren Effektor-T-Zellen, die das Luciferase-Enzym exprimieren.
Verabreichen Sie subkutan Interleukin 2, ein Zytokin, das das Überleben der Effektor-T-Zellen unterstützt.
Retroorbital injizieren Sie bispezifische Antikörper, die so konstruiert sind, dass sie Bindungsstellen für T- und Tumorzellen enthalten. Lassen Sie die Maus wiederherstellen.
Die Antikörper und T-Zellen gelangen über den Kreislauf in den Tumor.
Die Antikörper binden an CD3 auf den T-Zellen und TAA auf den Tumorzellen, wodurch die Effektor-T-Zellen dazu veranlasst werden, Toxine freizusetzen, die die Apoptose in den Tumorzellen initiieren, und Chemokine freizusetzen, die mehr T-Zellen für den Tumor rekrutieren.
Anästhesieren Sie die Maus, injizieren Sie retroorbital ein Luziferase-Substrat und fahren Sie mit der In-vivo-Bildgebung fort.
Die Luziferase in den T-Zellen oxidiert das Substrat und emittiert Biolumineszenz.
Beobachten Sie die Biolumineszenz im Laufe der Zeit. Die Größe des Signals korreliert mit dem Ausmaß der T-Zell-Infiltrati
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