JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:29 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Kolben mit stabil transfizierten Säugetierzellen in einem serumfreien Medium, das mit einem nichtionischen Tensid ergänzt wird, um eine Zellaggregation zu verhindern.
Diese Zellen tragen ein modifiziertes Genom, das integrierte Schwer- und Leichtkettengene für die therapeutische Antikörperproduktion enthält.
Stellen Sie Trypton vor, eine nährstoffreiche Quelle für Peptide und Aminosäuren, die für den Zellstoffwechsel unerlässlich sind.
Die Zelle nutzt diese Aminosäuren und Peptide und vermehrt sich, was zu einem Überwachsen führt, das eine höhere Antikörperausbeute unterstützt.
Die Expression von Genen in den Zellen treibt die Produktion von schwer- und leichtkettigen Polypeptiden voran.
Im endoplasmatischen Retikulum falten und dimerisieren sich diese Ketten über Disulfidbindungen zwischen den Ketten und bilden therapeutische Antikörper.
Im Golgi-Apparat werden Antikörper posttranslational modifiziert. Anschließend werden sie in Vesikel verpackt und in das Medium abgegeben.
Inkubieren Sie die Zellen für eine längere Zeit, um die Antikörperproduktion zu erhöhen.
Wenn die Lebensfähigkeit der Zellen abnimmt, ernten Sie den Überstand.
Filtern Sie den Überstand m
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos