JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:09 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie die Kryosektion einer Hautbiopsie von einem Parkinson-Patienten, der in einem Einbettungsmedium eingeschlossen ist.
Das Gewebe besteht aus einer äußersten Epidermis, einer darunter liegenden Dermis und subkutanem Fett, das von Nerven innerviert wird.
Waschen Sie den Abschnitt, um das Einbettmedium zu entfernen. Übertragen Sie es in eine Permeabilisierungs-Blockierungslösung, permeabilisieren Sie die Zellen und blockieren Sie unspezifische Bindungsstellen.
Tauchen Sie den Schnitt in einen primären Antikörper-Cocktail, um eine gleichmäßige Antikörpermarkierung zu erzielen, die als Free-Floating-Färbung bezeichnet wird.
Die Antikörper dringen in die Neuronen ein und binden an Alpha-Synuclein-Aggregate, die entlang der Axone verteilt sind – eine aggregierte Form, die für neurodegenerative Erkrankungen charakteristisch ist – und an Carboxyl-terminale Hydrolasen.
Führen Sie Fluorophor-konjugierte Sekundärantikörper ein, die an die Primärantikörper binden.
Mit einem fluoreszierenden DNA-Bindungsfarbstoff behandeln, der den Zellkern färbt.
Legen Sie das Taschentuch auf einen Objektträger, tragen Sie ein Eindeckmedium auf und verschließen Sie es mit einem Deckglas.
Unter einem ko
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos