JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 3:38 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie einen Objektträger mit Reaktionsvertiefungen, die Dünnschnitte verschiedener Pflanzengewebe enthalten. Das Gewebe wird fixiert und in ein Harz eingebettet, um die Immunfärbung zu ermöglichen.
Legen Sie den Objektträger in eine dunkle und feuchte Inkubationskammer, um Lichteinwirkung und Reagenzienverdunstung während der nachfolgenden Schritte zu verhindern.
Führen Sie eine Blockierungslösung ein, um unspezifische Antikörperinteraktionen zu verhindern.
Waschen, um überschüssige Blockierungslösung zu entfernen, dann antigenspezifische Primärantikörper hinzufügen und inkubieren.
Die Antikörper binden an ihre Zielantigene, nämlich Arabinogalactan-Proteine und Pektine in der Zellwand.
Führen Sie Fluorophor-konjugierte Sekundärantikörper ein, die an die Primärantikörper binden.
Waschen Sie, um die ungebundenen Antikörper zu entfernen, und tragen Sie einen Fluoreszenzfarbstoff auf, der an Zellulose bindet und die Zellwand markiert.
Fügen Sie ein Eindeckmedium hinzu und verschließen Sie es mit einem Deckglas.
Unter dem Mikroskop hilft die Fluoreszenz des Farbstoffs und der gebundenen Antikörper dabei, Zellulose in pflanzlichen Zellwänden sichtbar zu machen, die mit Arabinogalact
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