JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 5:42 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer passivierten Assay-Platte, die mit Tollwut-immunogenen Glykoprotein-spezifischen monoklonalen Antikörpern und einem Blockierungsmittel beschichtet ist, um unspezifische Wechselwirkungen zu verhindern.
Einführung von seriell verdünnten Referenz- und Test-Tollwutimpfstoffen mit abnehmendem Glykoproteingehalt. Versiegeln Sie die Platte, um eine Kontamination zu vermeiden.
Während der Inkubation interagieren immunogene Glykoproteine über eine spezifische antigene Stelle mit beschichteten monoklonalen Antikörpern.
Entfernen Sie nach der Inkubation den Film, saugen Sie den Überstand ab und waschen Sie die Platte.
Overlay mit enzymkonjugierten Glykoprotein-spezifischen monoklonalen Antikörpern, die an eine andere antigene Stelle auf dem Glykoprotein binden und einen Immunkomplex bilden.
Fügen Sie eine Lösung hinzu, die ein Substrat und ein Chromogen enthält. Wenn das Substrat mit dem Enzym interagiert, bewirkt es die Oxidation des Chromogens, wodurch sich die Farbe der Lösung ändert.
Fügen Sie eine Stopplösung hinzu, um die Enzyme zu inaktivieren.
Messen Sie die Extinktion und erstellen Sie eine Referenzkurve anhand der Referenzwerte für den Impfstoff.
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