Eine Technik zum Nachweis cyanobakterieller Stämme mit Hilfe eines Antikörper-Microarray-Chips
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 3:31 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Antikörper-Microarray-Chip, der mit spezifischen Antikörpern bedruckt ist.
Jeder Spot enthält einen einzigartigen Antikörper gegen einen bestimmten Cyanobakterienstamm.
Behandeln Sie den Chip mit einem Blockierungspuffer, um unspezifische Wechselwirkungen zu minimieren.
Bauen Sie den Chip in eine Hybridisierungskassette mit mehreren Vertiefungen ein.
Geben Sie eine Umweltprobe in die Vertiefungen und inkubieren Sie sie unter optimierten Bedingungen.
Die Probe enthält verschiedene Bakterien, darunter verschiedene Cyanobakterienstämme, die mit spezifischen Antikörpern auf dem gedruckten Chip interagieren. Waschen Sie den Chip, um die ungebundenen Bakterien zu entfernen.
Es wird ein Antikörpergemisch hinzugefügt, das fluorophormarkierte Antikörper gegen Cyanobakterienstämme enthält, die mit spezifischen Antigenen auf den jeweiligen Cyanobakterienzellen interagieren. Entfernen Sie ungebundene Antikörper.
Zerlegen Sie die Kassette, waschen und trocknen Sie den Chip und scannen Sie ihn.
Die Fluoreszenz an bestimmten Stellen bedeutet das Vorhandensein bestimmter Cyanobakterienstämme in der Probe.
Richten Sie den Objektträger in einer 3 x 8 Well-Microarray-Hybridisie
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