Ein Kapillarelektrophorese-Immunoassay für den Nachweis von Protein-Biomarkern
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Immunologie
0 Aufrufe • 7:32 Min. • July 8th, 2025
Um einen krankheitsassoziierten Protein-Biomarker nachzuweisen, nehmen Sie eine Immunoassay-Platte.
Die Platte enthält vorgefüllte Trenn- und Stapelmatrizen, die für die größenbasierte Proteintrennung erforderlich sind.
Laden Sie die Proteine und Immunoassay-Reagenzien in unterschiedliche Plattenvertiefungen.
Initiieren Sie den Lauf in einem CEI-Analysegerät. Die Kapillarpatrone im Analysator saugt die Matrizen an, um in jeder Kapillare ein Gel zu bilden.
Die Kapillare saugt dann die Proteine ab. Bei der Elektrophorese wandern die Proteine und trennen sich anhand ihres Molekulargewichts.
Der Analysator führt UV-Licht ein und immobilisiert die Proteine in der Kapillare.
Der Waschpuffer entfernt die Matrices und ungebundenen Proteine. Der Blockierungspuffer fließt dann ein und blockiert unspezifische Interaktionsstellen.
Der Analysator führt primäre Antikörper ein, die an den Biomarker binden, gefolgt von Peroxidase-konjugierten Sekundärantikörpern, die mit den primären Antikörpern interagieren.
Waschen Sie das Chemilumineszenzsubstrat und fügen Sie es hinzu. Die Peroxidase oxidiert das Substrat und emittiert Lumineszenz.
Messen Sie die Lumineszenzintensität und vergleichen Sie sie m
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