Eine Snap-Chip-Technologie für einen kreuzreaktivitätsfreien Multiplex-Sandwich-Immunoassay
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:36 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit der Zusammenstellung eines vorbehandelten Microarray-Assay-Objektträgers mit unterschiedlichen Spots, die proteinspezifische Capture-Antikörper für den Nachweis mehrerer Proteine enthalten.
Laden Sie die Verdünnungen des Proteinstandards und der vorverdünnten Serumproben in separate Vertiefungen. Diese Verdünnungen erzeugen eine Reihe von Proteinkonzentrationen für eine genaue Quantifizierung.
Inkubieren, um Protein-Antikörper-Wechselwirkungen zu erleichtern. Waschen Sie, um ungebundene Proteine zu entfernen, zerlegen und trocknen Sie den Objektträger.
Der Assay-Objektträger wird in einer Snap-Vorrichtung invertiert, die einen rehydrierten Transferobjektträger enthält, der mit proteinspezifischen biotinylierten Nachweisantikörpern an den gleichen Positionen wie der Assay-Objektträger versehen ist.
Schließen Sie das Gerät und drücken Sie, um die Dias übereinander zu schnippen. Dies erleichtert die Übertragung der Detektionsantikörper auf entsprechende Stellen auf dem Assay-Objektträger, wodurch die Kreuzreaktivität minimiert wird.
Trennen Sie die Objektträger, um die Wechselwirkung von Nachweisantikörpern mit gebundenen Proteinen zu ermöglichen, die Immunkomplexe bi
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