JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 5:19 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Objektträger mit anhaftenden Wirtszellen.
Fügen Sie Viren hinzu und lassen Sie sie in die Wirtszellen eindringen.
Entfernen Sie das verbrauchte Medium. Fügen Sie frisches Medium hinzu, um die Synthese und den Transport viraler Proteine zu ermöglichen.
Verwenden Sie Paraformaldehyd, um die Zellmorphologie und die Proteinposition zu erhalten.
Fügen Sie Detergenzmoleküle hinzu, um die Zellen durchlässig zu machen.
Wenden Sie einen Blockierungspuffer an, um Nichtzielbindungsstellen zu blockieren.
Fügen Sie primäre Antikörper hinzu, die virale Zielproteine binden. Entfernen Sie ungebundene Antikörper.
Overlay mit roten Fluorophor-konjugierten Sekundärantikörpern zur Fluoreszenzmarkierung der viralen Proteine. Entfernen Sie ungebundene Antikörper.
Fügen Sie ein fluoreszierendes Einbettmedium hinzu, das Kernfarbstoff enthält, um die Kerne zu färben.
Beobachten Sie mit der konfokalen Mikroskopie die Position von rot fluoreszierenden viralen Proteinen und blau fluoreszierenden Wirtskernen.
Ein stärkeres rotes Signal um den blauen Bereich herum deutet auf eine zytoplasmatische Lokalisation hin, während ein stärkeres Signal auf der Innenseite auf eine Kernlokalisation h
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos