Ein Assay zur Untersuchung des Einflusses einer photodynamischen Behandlung mit einem Photosensibilisator auf die Stoffwechselaktivität von Makrophagen

Nehmen Sie eine Multi-Well-Platte mit adhärenten Makrophagen.

Fügen Sie den Testwells einen seriell verdünnten Test-Photosensibilisator hinzu. Der Kontrollschacht fehlt der Photosensibilisator.

Inkubieren Sie für die zelluläre Aufnahme des Photosensibilisators.

Setzen Sie die Platte für eine bestimmte Dauer UV-Licht aus, das als photodynamische Behandlung oder PDT bezeichnet wird.

In den Testvertiefungen absorbieren Photosensibilisatoren innerhalb der Makrophagen UV-Licht und werden angeregt.

Diese angeregten Photosensibilisatoren reagieren mit molekularem Sauerstoff, bilden reaktive Sauerstoffspezies (ROS) und verursachen zelluläre Toxizität.

Um dem entgegenzuwirken, neutralisieren zelluläre antioxidative Enzyme, einschließlich Superoxiddismutase und Katalase, ROS und verhindern zelluläre oxidative Schäden.

Geben Sie das XTT-Reagenz, ein Tetrazoliumsalz und ein Elektronenkupplungsreagenz sowohl in die Test- als auch in die Kontrollbohrungen ein. Ausbrüten.

In stoffwechselaktiven Zellen überträgt das Trans-Plasma-Membran-Elektronentransportsystem Elektronen von mitochondrialem NADH auf das Elektronenkupplungsreagenz, wodurch XTT zu einem orangefarbenen Formazan-Produkt reduziert wi