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Immunologie
0 Aufrufe • 4:05 Min. • December 23rd, 2025
Nehmen Sie serielle Verdünnungen von Antikörpern ein, die spezifisch für das humane Cytomegalievirus (HCMV) sind.
Bei der Zugabe von HCMV binden die Antikörper an das Glykoprotein B auf der Virushülle und neutralisieren das Virus.
Die Mischung auf humane Fibroblasten übertragen und inkubieren.
Ein Trimer-Glykoprotein-Komplex auf den nicht-neutralisierten Viren bindet an spezifische zelluläre Rezeptoren, löst die Glykoprotein-B-vermittelte Virus-Wirt-Membranfusion aus und setzt das genomische DNA-haltige Nukleokapsid im Inneren frei.
Das freigesetzte Genom gelangt in den Zellkern und kodiert für nukleär lokalisierte sofort frühe Proteine (IE).
Die Antikörper-Neutralisation verhindert das Eindringen von Viren in die Zellen.
Entfernen Sie die nicht internalisierten Viren. Mit Ethanol bei Minustemperaturen behandeln, um die Zellen zu fixieren und zu permeabilisieren.
Führen Sie einen primären Antikörper ein, der an die IE-Proteine bindet.
Fügen Sie einen Fluorophor-konjugierten Sekundärantikörper hinzu, der an den Primärantikörper bindet, und eine Fluoreszenzfärbung, die an die DNA bindet.
Erkennen Sie unter einem Mikroskop doppelt gefärbte Zellen, die mit Viren infiziert sind. Berechn
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