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Immunologie
0 Aufrufe • 5:30 Min. • January 15th, 2026
Beginnen Sie mit seriell verdünntem Humanserum, das unterschiedliche Konzentrationen an neutralisierenden Antikörpern gegen das schwere akute respiratorische Syndrom, das Coronavirus 2 oder SARS-CoV-2 enthält.
Einführung von pseudotypisierten Viren mit Luciferase-RNA, Integrase und reverser Transkriptase, die in einer Lipiddoppelschicht mit SARS-CoV-2-Spike-Proteinen eingekapselt sind.
Antikörper neutralisieren die Viren auf der Grundlage der Serumverdünnung, wobei niedrigere Verdünnungen eine maximale Neutralisation aufweisen.
Führen Sie Zielzellen ein, die Angiotensin-konvertierende Enzym-2-Rezeptoren oder ACE2-Rezeptoren exprimieren, und Transmembranprotease Serin-2 oder TMPRSS2.
Bei höheren Serumverdünnungen interagieren nicht-neutralisierte Viren mit ACE2-Rezeptoren, während TMPRSS2 das Spike-Protein spaltet und so die Virusfusion ermöglicht.
Beim Eintritt wird die Luciferase-RNA in DNA umgekehrt transkribiert, die sich in das Wirtsgenom integriert und das Luciferase-Enzym produziert.
Ersetzen Sie das Medium durch einen Assay-Puffer, der Luciferase-Substrat und ein Lysierungsmittel enthält.
Die Zellen lysieren und setzen intrazelluläre Luziferase frei, die mit dem Substrat int
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