Messung des Immunglobulin-G-Spiegels im Vergleich zu einem Testimpfstoff in einem Mausserum

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte, die mit einem Testimpfstoff beschichtet ist, und blockieren Sie unspezifische Interaktionsstellen.

Entnehmen Sie eine Serumprobe von einer Maus, der der Testimpfstoff injiziert wurde.

Dieses Serum enthält Immunglobulin-G- oder IgG-Antikörper, die den Testimpfstoff erkennen.

Geben Sie in die mit Impfstoff beschichteten Vertiefungen seriell verdünnte Serumproben.

Die IgGs binden an den Impfstoff. Waschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.

Fügen Sie Peroxidase-konjugierte Sekundärantikörper hinzu, die an IgGs binden. Entfernen Sie ungebundene Sekundärantikörper.

Fügen Sie ein chromogenes Substrat hinzu. Die Peroxidase interagiert mit dem Substrat und erzeugt ein blau gefärbtes Produkt.

Führen Sie eine Säure ein, um die Reaktion zu stoppen. Die Änderung des pH-Werts färbt die Lösung gelb.

Messen Sie mit einem Spektralphotometer die Farbintensität jeder Vertiefung, um die IgG-Konzentration in der Serumprobe zu bestimmen.

Für die Antigenbeschichtung des Enzyme-linked Immunosorbent Assay oder der ELISA-Platte verdünnen Sie das HI-Proteinantigen auf 10 Mikrogramm pro Milliliter mit der Beschichtungslösung und fügen Sie 100 Mikroliter des verd