JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 3:49 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir eine Kultur von hängenden Tropfen gemischten Sphäroiden, bei denen es sich um heterogene Zellaggregate handelt, die aus Zielzellen bestehen, die Wachstumsfaktorrezeptoren exprimieren, und einem fluoreszierenden Protein, während Nichtzielzellen ein andersfarbiges fluoreszierendes Protein exprimieren.
Das Medium wird durch ein Antikörper-Photoabsorber-Konjugat ersetzt, das aus einem zielzellspezifischen monoklonalen Antikörper und einem Photoabsorberfarbstoff besteht.
Inkubieren, um die Bindung von Antikörpern an die Zielzellrezeptoren zu erleichtern.
Waschen Sie die Sphäroide mit Medien, um ungebundene Konjugate zu entfernen, und geben Sie sie dann in eine Glasbodenschale mit Medium für die Lichtbestrahlung.
Setzen Sie die Sphäroide für die Photoimmuntherapie Nahinfrarotlicht aus, wodurch eine photochemische Reaktion des Photoabsorberfarbstoffs auf den Zielzellen ausgelöst wird, was zu einer schnellen Schädigung der Zellmembran und zum Zelltod führt.
Dieser Prozess eliminiert Zielzellen, ohne Nicht-Zielzellen zu schädigen.
Übertragen Sie die Sphäroide auf eine frisch hängende Fallplatte. Fügen Sie Medien hinzu und inkubieren Sie für das Sphäroidwachstum.
Unter einem Fluor
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