Isolierung hämatopoetischer Stammzellen aus Nabelschnurblut zur Erzeugung von Mäusen des menschlichen Immunsystems
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Immunologie
0 Aufrufe • 5:23 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit menschlichen Nabelschnurblutzellen, einschließlich CD34+ hämatopoetischen Stammzellen oder HSCs.
Fügen Sie Antikörper hinzu, um zelluläre Fc-Rezeptoren zu blockieren und so eine unspezifische Bindung von HSC-spezifischen magnetischen Kügelchen zu verhindern.
Führen Sie die mit Antikörpern beschichteten magnetischen Kügelchen ein, die auf CD34+ HSCs abzielen. Zentrifugieren Sie und verwerfen Sie den Überstand.
Suspendieren Sie die Zellen in einem Puffer. Führen Sie sie durch einen magnetischen Abscheider, um perlengebundene HSCs zurückzuhalten. Ungebundene Zellen fließen hindurch.
Entfernen Sie das Magnetfeld, um die HSCs zu sammeln.
Zentrifugieren und resuspendieren Sie die Zellen in einem Wachstumsmedium. Die Zellen anrichten und inkubieren.
Das Medium enthält Wachstumsfaktoren und Zytokine, die das Überleben und die Expansion von HSC fördern.
Ernte die Zellen. Fügen Sie ein Gefriermedium hinzu, geben Sie es in ein Kryofläschchen und frieren Sie es ein.
Um ein Mausmodell für das menschliche Immunsystem (KIS) zu erzeugen, tauen Sie die HSCs auf und geben Sie sie in ein vorgewärmtes Medium.
Zentrifugieren Sie die Zellen und resuspendieren Sie sie in einem Puffer.
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