JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:17 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie Vertiefungen mit virusanfälligen Epithelzell-Monoschichten.
Geben Sie serielle Verdünnungen eines Testinterferons in die Testvertiefungen. Dem Kontrollschacht fehlt das Interferon.
In Testvertiefungen binden Interferone an Zellrezeptoren und lösen so eine Signalkaskade für die antivirale Proteinexpression aus.
Geben Sie nach der Inkubation das Zika-Virus in alle Vertiefungen.
Das Zika-Virus interagiert mit den Rezeptoren und Endozytosen der Wirtszelle.
Entfernen Sie nun nicht adsorbierte Viren. Fügen Sie dem Kontroll-Well Medien und den Test-Well Medien mit zusätzlichen Interferonen hinzu.
ausbrüten. In der Kontrollvertiefung nutzen internalisierte Viren die Wirtszellmaschinerie, um neue Viruspartikel zu bilden.
Die infizierten Zellen lysieren und setzen Viruspartikel frei, die andere Zellen infizieren und lysieren, wodurch klare lysierte Zonen oder Plaques in der Zellmonoschicht gebildet werden.
In Interferon-behandelten Zellen hemmen die antiviralen Proteine die Virusreplikation und die Zelllyse und verhindern so die Bildung von Plaque
.Zählen Sie mit einem Phasenkontrastmikroskop die viralen Plaques in den Vertiefungen.
Eine geringere Anzahl von Plaques in Interferon-
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