Ein Verfahren zur Behandlung dendritischer Zellen mit hohem Salzgehalt und deren adoptiver Transfer in Mäuse

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte, die eine Suspension von dendritischen Zellen oder DCs enthält.

Um einen hypertensiven Zustand nachzuahmen, fügen Sie ein Nährmedium hinzu, das eine hohe Konzentration an Natriumionen enthält, und inkubieren Sie.

Während der Inkubation dringen Natriumionen in die Zelle ein und erhöhen die intrazelluläre Natriumkonzentration.

Dies löst den Austausch von intrazellulären Natriumionen mit extrazellulären Kalziumionen aus.

Ein erhöhter interner Kalziumspiegel aktiviert Signalwege, die die Bildung von reaktiven Aldehyden erleichtern, die an die zellulären Proteine binden. Dadurch werden die DCs aktiviert, die diese modifizierten Proteine auf ihrer Oberfläche anzeigen.

Nach der Inkubation die Zellen in einem Röhrchen sammeln und zentrifugieren.

Entfernen Sie den Überstand. Fügen Sie frischen Puffer hinzu, um die Zellen zu resuspendieren.

Ziehen Sie die Zellsuspension in eine Spritze.

Nehmen Sie eine betäubte Maus und injizieren Sie die Zellsuspension retroorbital, d. h. einen Bereich hinter der Augenhöhle.

Dieser Prozess der Injektion aktivierter Immunzellen wird als adoptiver Zelltransfer bezeichnet.

Pipettieren Sie 900 Mikroliter der Gleichstroms