JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:16 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer gefesselten immungeschwächten NOD-Maus, der Immunzellen fehlen und die anfällig für Diabetes ist.
Dieser Maus wurden transgene Betazellen der Bauchspeicheldrüse vorinjiziert, die Insulin produzieren und Luciferase-Enzyme exprimieren.
Nehmen Sie eine Spritze mit vorbehandelten Splenozyten, die von einer diabetischen Maus stammen. Zu den Splenozyten gehören autoreaktive T-Zellen mit der Fähigkeit, die Insulinpeptide zu erkennen.
Verabreichen Sie diese Splenozyten in die Schwanzvene der Maus.
Die Splenozyten zirkulieren und erreichen die Bauchspeicheldrüse, wo die autoreaktiven T-Zellen die Insulinpeptide auf den Betazellen erkennen und aktiviert werden.
Diese aktivierten Zellen setzen zytotoxische Moleküle frei und leiten die Zerstörung der Betazellen durch Autoreaktivität ein.
Als nächstes injizieren Sie ein Luziferase-Substrat in das Bauchfell der Maus. Das Substrat diffundiert in dieser Region und gelangt in die Betazellen.
In den Zellen interagiert das Substrat mit den Luciferase-Enzymen und erzeugt Lumineszenz.
Mit einem biolumineszierenden Bildgebungssystem können Sie in regelmäßigen Abständen Bilder aufnehmen
Eine allmähliche Abnahme der Lumineszenz deut
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