JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:24 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Kryofläschchen mit kryokonservierten embryonalen Neuronen und legen Sie es zum kontrollierten Auftauen in einen Heizblock.
Übertragen Sie anschließend die aufgetauten Neuronen in ein Röhrchen und verdünnen Sie sie tropfenweise mit einem neurobasalen Medium, um den osmotischen Druck auszugleichen und die Zelllyse zu verhindern.
Dadurch entsteht eine homogene Suspension mit gleichmäßig verteilten Neuronen.
Die verdünnte neuronale Suspension wird auf eine mit Poly-L-Lysin beschichtete Multiwell-Platte ausgesät, die ein mit Nährstoffen und Antibiotika angereichertes neurobasales Medium enthält.
Inkubieren, damit das positiv geladene Poly-L-Lysin über elektrostatische Wechselwirkungen mit den Neuronen interagieren kann, was deren Adhärenz erleichtert.
Versorgen Sie die Vertiefungen mit frischen neurobasalen Medien.
Inkubieren Sie die Zellen im selben Medium unter feuchten Bedingungen, um eine Verdunstung des Mediums zu verhindern.
Die embryonalen Neuronen nutzen die Nährstoffe und wachsen, indem sie neuronale Prozesse entwickeln und primäre Neuronen bilden.
Das neurobasale Medium erhält die primären Neuronen, die weit auseinander zu liegen scheinen, und erzeugt ei
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