JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 7:00 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine mit extrazellulärer Matrix beschichtete Mikroplatte und fügen Sie humane pluripotente Stammzellen hinzu, die in einem Differenzierungsmedium suspendiert sind.
Das Medium enthält Signalmoleküle, die zelluläre Signalwege beeinflussen und die Differenzierung in neurale Vorläuferzellen lenken.
Einführung eines weiteren Differenzierungsmediums, das Signalmoleküle enthält, die die Differenzierung in Neuralleistenzellen (NCCs) induzieren, Vorläufer neuronaler und nicht-neuronaler Zellen.
Fügen Sie Enzyme hinzu, um die Matrix zu stören und dadurch die Zellen zu dissoziieren.
Waschen, um die Enzyme zu neutralisieren, dann zentrifugieren und den Überstand verwerfen. Resuspendieren Sie die NCCs in einem Sphäroidmedium und übertragen Sie sie auf eine Mikrotiterplatte.
Die Wachstumsfaktoren und kleinen Moleküle des Mediums induzieren die Bildung von Sphäroiden.
Ergänzung mit Retinsäure, die die Differenzierung in sympathische Vorläuferneuronen fördert.
Übertragen Sie das Sphäroid auf eine mit Adhäsionsprotein beschichtete Mikroplatte in einem sympathischen Neuronenreifungsmedium, wodurch eine Sphäroidbindung verursacht wird.
Neuronale Wachstumsfaktoren und Retinsäure im Medium f
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