Eine indirekte Neuron-Astrozyten-Co-Kulturtechnik zur Untersuchung von Neuron-Glia-Interaktionen

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte, die einen permeablen Membraneinsatz enthält, der mit Poly-D-Lysin beschichtet ist.

Geben Sie Astrozyten-Wachstumsmedium in die Vertiefung und säen Sie Astrozyten, eine spezialisierte Gliazelle, in den Einsatz ein.

Inkubieren, um die Zelladhärenz an Poly-D-Lysin über elektrostatische Wechselwirkungen zu ermöglichen und eine Monoschicht zu bilden.

Ersetzen Sie das Astrozytenmedium durch ein Neuronenkulturmedium.

Übertragen Sie diesen Einsatz in eine Multi-Well-Platte, die anhaftende primäre embryonale Mausneuronen über einem polymerbeschichteten Deckglas enthält.

Inkubieren Sie, um eine indirekte Neuron-Astrozyten-Co-Kultur zu etablieren, bei der die beiden Zelltypen physisch getrennt sind und sich jedoch das gleiche Kulturmedium teilen.

Astrozyten sezernieren verschiedene neurotrophe Faktoren, die für das Überleben und Wachstum von Neuronen unerlässlich sind.

Diese Faktoren wandern durch die permeable Unterstützung und interagieren mit primären Neuronen. Dies fördert ihre Differenzierung und bildet neuronale Projektionen.

Diese Projektionen verlängern sich und stellen synaptische Verbindungen zwischen Neuronen her, was auf Neuron-Glia-Intera