Kompartimentierte primäre murine Neuronenkultur mit mikrofluidischen Kunststoffchips

Nehmen wir einen mikrofluidischen Kunststoffchip, der aus somatischen Reservoiren und Kompartimenten sowie axonalen Reservoiren und Kompartimenten besteht, die durch Mikrorillen verbunden sind.

Fügen Sie eine Vorbeschichtungslösung hinzu, um die Kammern und Rillen zu sättigen und das Einschließen von Luftblasen zu verhindern.

Saugen Sie die Lösung an, wobei die Hauptfächer gefüllt bleiben. Mit Puffer waschen.

Beschichten Sie die Vertiefungen mit einem synthetischen Polymer, das die neuronale Adhäsion erleichtert. Mit Puffer waschen und Nährmedien hinzufügen, um ein Austrocknen des Chips zu verhindern.

Um eine Suspension von Hippocampus-Neuronen der Ratte zu säen, aspirieren Sie das Medium.

Laden Sie die Suspension in die somatischen Behälter. Die Neuronen dringen in das somatische Kompartiment ein und heften sich daran.

Geben Sie neuronale Nährmedien in die Vertiefungen und inkubieren Sie. Wachstumsfaktoren, die in den Medien vorhanden sind, erleichtern das neuronale Wachstum.

Nach und nach verlängern die Neuronen ihre Axone, die durch die Mikrorillen in das axonale Kompartiment hineinwachsen.

Die Enge der Rillen verhindert das Eindringen von neuronalen Zellkörpern und gewährleiste