JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:06 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit Nervenzellen, die in einem Zelldifferenzierungsmedium kultiviert werden.
Geben Sie Gold-Nanostäbchen in das Medium.
Inkubieren, damit die Zelle das Nanostäbchen durch einen Prozess namens Endozytose verschlingen kann.
Stimulieren Sie die Nanostäbchen mit einem Laser.
Der Laserstrahl regt die Oberflächenelektronen auf dem Nanostäbchen an. Die angeregten Elektronen kehren dann in den Grundzustand zurück und setzen Wärmeenergie frei.
Diese Hitze regt die Nervenzellen an, Projektionen zu produzieren, die von einem spezifischen Zytoskelettprotein namens βIII-Tubulin unterstützt werden.
Entfernen Sie das verbrauchte Medium.
Fixieren Sie die Zellen. Fügen Sie ein geeignetes Reinigungsmittel hinzu, um die Membran zu permeabilisieren.
Fügen Sie ein Blockierungsmittel hinzu, um die unspezifische Bindung von Antikörpern zu verhindern.
Markieren Sie die Zellen mit primären Antikörpern, die auf das βIII-Tubulin abzielen.
Fügen Sie fluoreszenzmarkierte Sekundärantikörper hinzu, die mit den Primärantikörpern interagieren.
Färben Sie den Zellkern mit einem blauen Fluoreszenzfarbstoff.
Beobachten Sie mit Hilfe der Epifluoreszenzmikroskopie rot gefärbte Zellen mit blauen Zellkernen.
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