Erzeugung neuronaler Zellen aus pluripotenten Stammzellen aus dem Blut

Nehmen Sie eine Mikroplatte mit Glasdeckgläsern, die am Boden der Vertiefungen platziert sind.

Führen Sie ein positiv geladenes Polymer ein, um die Deckgläser zu beschichten, und waschen Sie, um ungebundenes Polymer zu entfernen. Behandeln Sie mit einem extrazellulären Matrixprotein, um die Deckgläser zu beschichten und die ungebundenen Proteine abzusaugen.

Die Beschichtung fungiert als Kultursubstrat, das die Zelladhäsion erleichtert.

Geben Sie ein Induktionsmedium in die Vertiefungen und führen Sie eine Suspension von aus Blut gewonnenen pluripotenten Stammzellen oder BD-PSCs ein. Diese Zellen, die in der Lage sind, sich in verschiedene Zelltypen zu differenzieren, werden durch die Reprogrammierung von Blutvorläuferzellen erzeugt.

Inkubieren, damit die Zellen am Substrat haften. Wachstumsfaktoren und Nährstoffe im Induktionsmedium verwandeln BD-PSCs in neurale Vorläuferzellen.

Führen Sie ein Differenzierungsmedium ein, das neuronale Wachstumsfaktoren enthält, und inkubieren Sie, wodurch die Differenzierung der neuralen Vorläuferzellen in einen neuronalen Phänotyp ausgelöst wird, der ausgedehnte zelluläre Prozesse und Zell-Zell-Kontakte aufweist.

Legen Sie Glasdeckgläser in 4-Well