Präparation frei schwebender Schnittkulturen aus einem erwachsenen menschlichen Gehirn

Nehmen Sie ein menschliches Gehirngewebe, das in eine Schneidelösung getaucht ist. Der biologische pH-Wert und die Nährstoffe der Lösung tragen zur Aufrechterhaltung der Gewebefunktionalität bei.

Entfernen Sie die äußerste Hirnhäuteschicht und schneiden Sie das Gewebe ab, um eine ebene Oberfläche zu erhalten.

Tupfen Sie überschüssige Lösung aus dem Gewebe. Befestigen Sie das getrimmte Gewebe mit einem Agaroseblock an einer Probenscheibe und halten Sie das Gewebe in Kontakt mit dem Block, um das Schneiden zu erleichtern.

Legen Sie die Scheibe in eine Vibratom-Pufferschale und bedecken Sie das Gewebe mit einer eiskalten Schnittlösung.

Erzeugen Sie mit dem Vibratom gleichmäßige Scheiben, die die Gewebearchitektur erhalten.

Schneiden Sie überschüssiges Gewebe ab und sorgen Sie für einen gleichmäßigen Anteil an grauer und weißer Substanz.

Legen Sie die Scheiben in eine Multiwell-Platte, die ein Nährmedium enthält, und inkubieren Sie.

Die Scheiben bleiben im Medium suspendiert, um einen gleichmäßigen Nährstoffzugang zu gewährleisten, eine Technik, die als Free-Floating-Scheibenkultur bekannt ist.

Füllen Sie die Kultur regelmäßig mit einem mit neuronalen Wachstumsfaktoren supplementierten