Eine Technik zur verlängerten Inkubation von neuronalem Gewebe der Netzhaut

Nehmen Sie ein intaktes Mausauge in künstlichem Liquor (aCSF) und schneiden Sie ein, um die Augenmuschel mit der Netzhaut zu isolieren.

Behandeln Sie mit einer enzymatischen Lösung, um die innere Grenzmembran zu entfernen und die neuronalen Zellen freizulegen.

Tauchen Sie das Gewebe in eine Hemmlösung, um die Verdauung zu stoppen, und waschen Sie es, um überschüssige Lösung zu entfernen.

Legen Sie das Gewebe bei niedriger Temperatur in einen speziellen Inkubator, um den Zellstoffwechsel zu verlangsamen und das Gewebe zu erhalten.

Dieser Inkubator besteht aus einer Hauptkammer mit einem Netz zur Aufnahme von Geweben. Die Kammer ist mit aCSF gefüllt und seine Temperatur und sein pH-Wert werden kontrolliert, um die Funktionalität des Gewebes zu erhalten.

Um eine mikrobielle Kontamination zu vermeiden, wird der aCSF in eine andere Kammer gepumpt und mit ultravioletter Strahlung behandelt, um alle Mikroben abzutöten.

Das sterilisierte aCSF wird dann wieder in die Hauptkammer gepumpt.

Um die Netzhaut zu isolieren, entfernen Sie die Augenmuschel, trennen Sie die Netzhaut vom umgebenden Gewebe und legen Sie sie wieder in den Inkubator.

Für die Präparation einer Netzhaut-Ganzlafette entkern