Etablierung eines Hirntumors in einem organotypischen Scheiben-Co-Kulturmodell

Beginnen Sie mit einer in Agarose eingebetteten Maushirnschnitte.

Platzieren Sie das Hirnschnitt auf einem Membraneinsatz, der ein Nährmedium enthält.

Tauchen Sie die Scheibe ein, um eine gleichmäßige Einwirkung von Nährstoffen zu gewährleisten.

Sammeln Sie ein kleines Volumen des Mediums aus dem Einsatz und übertragen Sie es auf den Boden der Vertiefung.

Entfernen Sie das überschüssige Medium von der Einlage.

Übertragen Sie den Einsatz in eine Petrischale, in der sich das Nährmedium befindet.

Entfernen Sie vorsichtig die Agaroseränder von der Scheibe, um sie für spätere Interaktionen zugänglich zu machen.

Setzen Sie den Einsatz in eine neue Vertiefung ein, die das Nährmedium enthält, und inkubieren Sie es, um die Rückgewinnung der Scheibe zu erleichtern.

Geben Sie menschliche Hirntumorzellen in die Scheibe und inkubieren Sie.

Tumorzellen interagieren mit Gehirnzellen und der Mikroumgebung innerhalb der Schnitte, initiieren die Vermehrung und etablieren ein 3D-Co-Kulturmodell.

Legen Sie mit einem Schaumlöffel eine Gehirnscheibe in das Medium auf dem Einsatz und drücken Sie die Scheibe vorsichtig an, so dass sie vollständig untergetaucht ist. Wiederholen Sie den Vorgang für alle Sch