JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:26 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die mit einem Tensid beschichtet ist, um die Oberflächenspannung der Vertiefung zu verringern.
Geben Sie das gewünschte Verhältnis von Astrozyten und Neuronen in ein geeignetes Kulturmedium.
Zentrifugieren Sie, um die Zellen abzusetzen, und inkubieren Sie dann.
Die niedrige Oberflächenspannung verhindert, dass Zellen an der Well-Oberfläche haften bleiben und sich dort verklumpen.
Die Zellen haften durch verschiedene Membranwechselwirkungen, einschließlich Adhäsionsmolekülen, aneinander und bilden eine 3D-Kokulturkugel.
Sammle die Kugeln und übertrage sie in ein Rohr.
Lassen Sie die Kugeln absetzen. Entfernen Sie den Überstand und fügen Sie frisches Nährmedium hinzu.
Die Kugeln werden in einen Spinnerkolben mit einem geeigneten Nährmedium überführt und unter ständigem Drehen inkubiert.
In der Kugel verlängern die Neuronen ihre Projektionen aufeinander zu und bilden eine Verbindung, die als Synapse bezeichnet wird, während sich der Astrozyt in Richtung Synapse erstreckt und eine enge Assoziation mit den Neuronen herstellt.
Geben Sie das gewünschte Verhältnis von dissoziierten hAstros und hNeuronen oder iNeuronen in einem Gesamtvolumen von zwei Millil
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