Isolierung von DRG-Neuronen und Kokultur mit Schwann-Zell-Vorläufern zur Erzeugung von Schwann-Zellen
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:25 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie das Rückenmark eines Rattenembryos mit angehängten Spinalwurzelganglien (DRGs), die Neuronen und Gliazellen enthalten.
Lösen Sie einzelne DRGs vom Strang, übertragen Sie sie in ein Röhrchen und zentrifugieren Sie, wobei Sie alle Gewebereste entsorgen.
Fügen Sie Enzyme hinzu, um DRG-Neuronen und Gliazellen zu dissoziieren.
Schleudern Sie die Zellen herunter und entfernen Sie alle Ablagerungen. Fügen Sie ein neuronales Erhaltungsmedium hinzu und trituieren Sie, um eine einzellige Suspension zu erzeugen.
Übertragen Sie die Suspension in eine Mikrotiterplatte, die mit einem Kultursubstrat beschichtet ist, um die Zelladhärenz zu fördern.
Geben Sie ein Reinigungsmedium ein und inkubieren Sie. Die hemmenden Wirkstoffe des Mediums eliminieren sich teilende Gliazellen, während sich nicht teilende Neuronen überleben.
Nehmen Sie Schwann-Zell-ähnliche Zellen (SCLCs) in einem Co-Kulturmedium ein. SCLCs, die Vorläufer der Schwann-Zellen, interagieren mit embryonalen peripheren Nervenneuronen.
Führen Sie die Suspension in die DRG-Neuronen ein und inkubieren Sie. Die Interaktion der SCLCs mit DRG-Neuronen fördert deren Reifung zu Schwann-Zellen.
Die erzeugten Schwann-Zellen stehen für d
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