Direkte Reprogrammierung von hämatopoetischen Vorläuferzellen in neurale Stammzellen

Beginnen Sie mit einer Zellsuspension aus genetisch veränderten hämatopoetischen Vorläuferzellen.

Diese Zellen exprimieren Transkriptionsfaktoren, die für ihre Reprogrammierung in neurale Stammzellen erforderlich sind. Dieser Vorgang wird als direkte Reprogrammierung bezeichnet.

Übertragen Sie die Zellen auf eine mit extrazellulärer Matrix beschichtete Multiwell-Platte mit einem neuralen Vorläufermedium und inkubieren Sie.

Die extrazelluläre Matrix bildet ein dreidimensionales Gerüst für die Zellansiedlung und das Zellwachstum.

Während der Inkubation initiieren Transkriptionsfaktoren, die von der hämatopoetischen Vorläuferzelle exprimiert werden, eine Abfolge von molekularen Ereignissen, die ihre Umwandlung in eine neurale Stammzelle ermöglichen.

Das neuronale Vorläufermedium enthält Faktoren, die das Überleben induzierter neuraler Stammzellen begünstigen.

Ersetzen Sie dieses Medium nach der Inkubation durch ein frisches neuronales Vorläufermedium, um die Zellvermehrung zu fördern.

Trennen Sie die Zellen mit einem Zellschaber.

Sammeln Sie diese Suspension und übertragen Sie die Zellen in eine Vertiefung mit neuronalem Stammzellmedium.

Inkubieren zur Erhaltung von induzierten neural