Differenzierung einer humanen Neuroblastom-Zelllinie in reife Neuronen

Beginnen Sie mit einer undifferenzierten Neuroblastom-Zelllinie, die neuronenähnliche und epithelähnliche Zellen in einem Medium mit hoher Serumkonzentration umfasst.

Entfernen Sie das Medium und fügen Sie ein Differenzierungsmedium mit einer reduzierten Serumkonzentration hinzu, das mit Retinsäure ergänzt wird.

Serumentzug verhindert die Proliferation epithelähnlicher Zellen.

Retinsäure induziert die neuronale Genexpression in den neuronenähnlichen Zellen und verwandelt sie in einen differenzierteren Phänotyp.

Fügen Sie einen Trypsin-EDTA-Cocktail hinzu, um die teilweise differenzierten Zellen zu lösen.

Fügen Sie Medien hinzu, die Serumproteine enthalten, um Trypsin zu blockieren.

Plattieren Sie die Zellen und führen Sie ein frisches Differenzierungsmedium ein, das Retinsäure und einen weiter reduzierten Serumspiegel enthält.

Die Zellen entwickeln weiterhin ausgedehnte Prozesse.

Fügen Sie Trypsin hinzu, um die Zellen zu lösen.

Fügen Sie als Nächstes Medien hinzu, um Trypsin zu blockieren, und plattieren Sie die Zellen auf einer mit extrazellulären Matrixproteinen beschichteten Schale, um die Zelladhäsion zu fördern.

Zum Schluss mit serumfreiem Medium ergänzen, das neuronale Wachst