Eine Technik zur Erzeugung neuraler Vorläuferzellen aus embryonalen Stammzellen der Maus

0 Aufrufe • 2:22 Min. • July 8th, 2025

Nehmen Sie embryonale Stammzellen (mESCs) der Maus, die in einem Differenzierungsmedium suspendiert sind, und inkubieren Sie.

In der Suspensionskultur aggregieren mES-Zellen zu einer Struktur, die als Embryoidkörper oder EBs bezeichnet wird.

EBs sind dreidimensionale Aggregate, die einen sich entwickelnden Embryo nachahmen und zu Nervenzellen differenziert werden können.

Übertragen Sie die EBs in ein Rohr und lassen Sie sie durch die Schwerkraft absetzen.

Entfernen Sie das nährstoffarme Medium, resuspendieren Sie die EBs in einem frischen Medium und geben Sie sie in eine Kulturschale.

Inkubieren Sie die Suspensionskultur, um das Wachstum von EBs zu erleichtern.

Übertragen Sie die im Medium suspendierten EBs auf eine Multiwell-Platte. Die Wells sind mit einem Adhäsionsprotein beschichtet, so dass sich die EBs anlagern können.

Führen Sie Retinsäure ein, die in die Zellen eindringt und die Bildung eines Transkriptionskomplexes auslöst.

Der Komplex induziert die Genexpression und fördert die Differenzierung der Zellen zu neuralen Vorläuferzellen (NPCs), die ausgedehnte zelluläre Prozesse aufweisen.

Geben Sie 1,5 Millionen embryonale Stammzellen von Mäusen in eine nicht klebende Bakteri

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