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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:01 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie vorgewaschene sensorische Ganglien in einer Röhre.
Fügen Sie eine Dissoziationslösung hinzu, die eine Mischung aus Verdauungsenzymen enthält, und inkubieren Sie.
Diese Enzyme brechen die extrazelluläre Matrix auf und geben einzelne Zellen frei.
Entfernen Sie nach der Inkubation die Dissoziationslösung.
Waschen Sie die Ganglien mit einem Phosphatpuffer und fügen Sie eine frische Dissoziationslösung hinzu.
Pipettieren Sie die Ganglien auf und ab, um die Zellen zu dissoziieren.
Lassen Sie die Suspension durch ein Zellsieb, um alle Klumpen zu entfernen.
Sammeln Sie alle verbleibenden Zellen vom Boden des Siebs und geben Sie sie in das Röhrchen.
Schichten Sie die Zellsuspension über ein Dichtegradientenröhrchen und eine Zentrifuge.
Aufgrund der Unterschiede in Form und Masse wandern die Zellen in die untere Schicht, während zelluläre Trümmer in der oberen Schicht verbleiben.
Entsorge die obere Schicht.
Geben Sie frisches Medium in die verbleibende Zellsuspension und Zentrifuge.
Entsorgen Sie den Überstand und lagern Sie die sensorischen Ganglienzellen für die weitere Verwendung.
Nach der Entnahme der sensorischen Ganglien aspirieren Sie 500 Mikroliter Gangliendissoziationslös
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