Eine modifizierte Rollenrohrmethode für die Langzeitkultur von Hirnschnitten von Nagetieren

Nehmen Sie Gehirnschnitte, die aus einem Nagetiergehirn gewonnen wurden. Die Schnitte bestehen aus dem Hippocampus, in dem sich Hippocampus-Neuronen befinden.

Übertragen Sie die Gehirnschnitte auf Deckgläser, die Hühnerplasma enthalten.

Tragen Sie mit Thrombin gemischtes Plasma auf die Scheiben auf. Thrombin induziert die Plasmakoagulation und bildet ein biologisches Gerüst, das die Haftung der Scheiben an den Deckgläsern fördert.

Nehmen Sie flache Rollenrohre mit einem Loch auf der flachen Seite und einer Klebescheibe, die um das Loch an der Außenseite der Rohre befestigt ist.

Positionieren Sie die Deckgläser auf den Klebeplättchen und achten Sie darauf, dass die Hirnschnitte zum Inneren der Röhrchen zeigen.

Geben Sie ein neuronales Kulturmedium in die Röhrchen und lassen Sie ein Kohlendioxid-Luft-Gemisch einströmen.

Verschließen Sie die Röhrchen, legen Sie sie in ein Rollengestell und inkubieren Sie sie mit einer Rollbewegung.

Die Belüftung durch die rollende Inkubation und die Nährstoffe des Mediums unterstützen die langfristige Kultivierung der Hirnschnitte.

Bereiten Sie zunächst das Rollenrohrgestell vor und machen Sie eine Vorrichtung, um das Bohren eines Lochs in die Rollenr