JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:13 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir menschliches Glioblastomgewebe, einen primären Hirntumor, der aus Gliazellen stammt.
Waschen Sie das Tuch mit einem eiskalten Verarbeitungsmedium, um Blutreste zu entfernen.
Schneiden Sie das Gewebe in Stücke und legen Sie es in eine Einbettform mit geschmolzener Agarose.
Kühle die Form, damit die Agarose polymerisieren und eine stabile Gelmatrix bilden kann.
Entfernen Sie den Gewebeblock aus der Form und fixieren Sie ihn auf der Probenplatte eines Vibratoms.
Fügen Sie das eiskalte Verarbeitungsmedium hinzu, um den Block einzutauchen. Lassen Sie ein sauerstoffreiches Gasgemisch passieren, um das Medium zu belüften und die Lebensfähigkeit des Gewebes zu erhalten.
Teilen Sie das eingebettete Tumorgewebe in dünne Scheiben.
Übertragen Sie eine Scheibe in eine Petrischale mit dem eiskalten Verarbeitungsmedium, um die Gewebearchitektur zu erhalten.
Plattieren Sie dann die Gewebescheibe auf einem durchlässigen Membraneinsatz in einer Vertiefung, die ein Scheibenkulturerhaltungsmedium enthält.
Halten Sie die Scheibe unter physiologischen Bedingungen. Die Schnittkultur ist bereit für nachgelagerte Assays.
Beginnen Sie damit, leere PTFE-Kultureinsätze mit einer sterilen Pinzette i
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