JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:02 Min. • July 8th, 2025
Beginnen wir mit den Gliomsphären, Zellaggregaten, die von einem Hirntumor oder Glioblastom abgeleitet sind.
Dissoziationsenzyme hinzufügen. Inkubieren, um die Glioblastomzellen zu trennen und eine Einzelzellsuspension zu erhalten.
Führen Sie als Nächstes ein mit Serum angereichertes Nährmedium ein, um die Enzymaktivität zu stoppen.
Zentrifugieren und den Überstand entfernen, dann die Zellen wieder suspendieren.
Die Suspension filtrieren, dann zentrifugieren und den Überstand entfernen.
Resuspendieren Sie die Zellen in Hydrogel-Vorläufern, die kleine Peptide enthalten.
Laden Sie diese Mischung mit einer vormontierten Silikonform, die Hyaluronsäure enthält, in Vertiefungen.
Mischen Sie die Lösung. Inkubieren, um die Wechselwirkung zwischen der Hyaluronsäure und den Hydrogel-Vorläufern zu ermöglichen und ein Hydrogel zu bilden, das die Zelleinschlussung erleichtert.
Überlagern Sie das Hydrogel mit Kulturmedien, um das Überleben der Zellen zu erhalten.
Nachdem Sie die Form zerlegt haben, inkubieren Sie das Hydrogel.
Innerhalb des Hydrogels interagieren die Adhäsionsproteine auf den Zellen mit den Vorläuferpeptiden und der Hyaluronsäure.
Dies führt dazu, dass sich Zellen zu kleinen Clu
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