Erzeugung einer Organoidkultur aus einer Suspension von Hirntumorzellen

Beginnen Sie mit einem Mikrozentrifugenröhrchen, das eine lamininreiche extrazelluläre Matrix oder lrECM enthält. Laminin ist ein struktureller Bestandteil, der im Gehirn reichlich vorhanden ist.

Halten Sie das Röhrchen auf Eis, um eine IrECM-Polymerisation zu verhindern.

Fügen Sie Hirntumorzellen hinzu und mischen Sie gründlich, um eine gleichmäßige Verteilung der Zellen zu gewährleisten.

Übertragen Sie anschließend die Mischung auf Parafilmformen und bilden Sie Tröpfchen.

Inkubieren, um die lrECM-Polymerisation zu erleichtern und ein Gerüst zu bilden, das die natürliche Umgebung der Zellen nachahmt.

Spülen Sie nun die erstarrten Organoide in eine Petrischale, in der sich ein Kulturmedium befindet, und inkubieren Sie sie.

Das Kulturmedium liefert essentielle Nährstoffe und Wachstumsfaktoren und unterstützt so die Zellteilung.

Innerhalb des Organoids organisieren sich die Zellen selbst, indem sie wandern und eindringen.

Kippen Sie nach der Inkubation die Platte, um die Organoide abzusetzen.

Entfernen Sie vorsichtig das überschüssige Medium und fügen Sie frisches Medium hinzu.

Mit leichtem Schütteln inkubieren.

Dadurch werden die Nährstoffe gleichmäßig verteilt und das Wachstum der