JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:00 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit der Aussaat menschlicher embryonaler Stammzellen auf einer matrixbeschichteten Multiwell-Platte.
Die Matrixumgebung verhindert eine vorzeitige Reifung zu einer spezialisierten Zelle.
Fügen Sie ein geeignetes Erhaltungsmedium hinzu, das mit Dimethylsulfoxid oder DMSO ergänzt ist.
Die DMSO-Behandlung verstärkt die Reaktion der Zellen auf Reifungssignale.
Ersetzen Sie als Nächstes das Medium durch ein neuronales Induktionsmedium, das spezifische Inhibitoren enthält.
Inhibitoren blockieren die Signale der nicht-neuralen Zellentwicklung und leiten die Stammzellen an, sich in neuronale Vorläuferzellen oder NPCs zu verwandeln.
Ersetzen Sie das Medium durch eine Ablösung, um die NPCs zu dissoziieren. Füllen Sie die gewünschte Anzahl von Zellen auf eine andere Multiwell-Platte auf.
Fügen Sie ein zellspezifisches Differenzierungsmedium hinzu, das mit DMSO ergänzt wird, um die Umwandlung von NPCs in Oligodendrozyten-Vorläuferzellen oder OPCs zu fördern.
Ersetzen Sie das Medium durch ein zellspezifisches Reifungsmedium, um die Entwicklung von OPCs zu Oligodendrozyten zu erleichtern.
Um die Generierung neuraler Vorläuferzellen durchzuführen, kultivieren Sie H1-humane ES-Zellen
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