JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:34 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie das Mauswelpen Cerebella.
Homogenisieren Sie sie in kleinere Fragmente.
Fügen Sie ein proteolytisches Enzym hinzu, um die extrazelluläre Matrix des Gewebes zu verdauen und zerebelläre granuläre Vorläuferzellen (CGNPs) und Astrozyten zu lockern.
Fügen Sie CGNP-Nährmedien mit Serum hinzu, um die enzymatische Aktivität zu stoppen. Zentrifugieren und den enzymreichen Überstand verwerfen.
Resuspendieren Sie die Gewebefragmente in CGNP-Medien. Dissoziieren Sie das Gewebe mechanisch, um die Zellen freizusetzen.
Sobald sich die Ablagerungen abgesetzt haben, überträgst du den Überstand mit den Zellen in ein frisches Röhrchen.
Zentrifugieren und den Überstand mit Schmutz entfernen.
Resuspendieren Sie die Zellen in CGNP-Medien und säen Sie sie in Multiwell-Plattenvertiefungen, die mit Poly-D-Lysin beschichtet sind. Ausbrüten.
Astrozyten siedeln sich an der Poly-D-Lysin-Beschichtung an und haften im Vergleich zu CGNPs stark.
Die Platte schütteln und den Überstand mit CGNPs auffangen. Zentrifugieren und den Überstand entfernen.
Resuspendieren Sie CGNPs in CGNP-Medien und säen Sie sie auf eine mit Poly-L-Ornithin beschichtete Multiwell-Platte. Ausbrüten.
CGNPs lagern sich an die besch
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos