Differenzierung von neuralen Stammzellen zu Neuronen mit Hilfe eines kompartimentierten mikrofluidischen Geräts
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:12 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir ein mikrofluidisches Gerät, das aus Reservoirvertiefungen besteht, die mit zwei Kompartimenten, einem somatischen und einem axonalen, verbunden sind, die durch eine Mikrorillenbarriere getrennt sind.
Die Kompartimente und Mikrorillen sind mit einem Zellkultursubstrat beschichtet, um die Zelladhäsion zu erleichtern.
Geben Sie ein neuronales Stammzellmedium in jede Vertiefung und inkubieren Sie, um das Gerät für die Zellkultur vorzukonditionieren.
Entsorgen Sie die Medien. Fügen Sie neurale Stammzellen (NSCs) zu den Vertiefungen des somatischen Kompartiments hinzu und lassen Sie die Zellen anhaften.
Geben Sie das NSC-Medium in jede Vertiefung und inkubieren Sie es in einer befeuchteten Kammer, um eine Verdunstung des Mediums zu verhindern. Während der Inkubation vermehren sich die NSCs.
Ersetzen Sie das NSC-Medium durch ein neuronales Differenzierungsmedium und inkubieren Sie.
Die kleinen Moleküle im Medium induzieren die Differenzierung von NSCs in Neuronen innerhalb des somatischen Kompartiments, wobei sich ihre Axone durch die Mikrorillen in das axonale Kompartiment erstrecken.
Die differenzierten Neuronen mit verlängerten Axonen sind bereit für weitere Assays.
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