JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:49 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Rattenkopfmuskel und hacken Sie ihn in Fragmente.
Fügen Sie einen Cocktail proteolytischer Enzyme hinzu und inkubieren Sie ihn unter leichtem Schütteln.
Die Enzyme verdauen die extrazelluläre Matrix des Gewebes und lockern so die Muskelfasern.
Fügen Sie Medien hinzu, die Serumproteine enthalten, um die Enzyme zu inaktivieren.
Übertragen Sie das Gewebe in ein Röhrchen, zentrifugieren Sie und entsorgen Sie den Überstand.
Suspendieren Sie das Gewebe wieder in Medien. Wiederholen Sie den mechanischen Aufschluss und die Zentrifugation zweimal, um eine homogene Suspension von Satellitenzellen zu erhalten – Stammzellen, die für die Muskelreparatur und -regeneration entscheidend sind.
Sammeln Sie den Überstand mit der Satellitenzelle.
Durch ein Zellsieb passieren, um eine einzellige Suspension zu erhalten. Zentrifugieren, den Überstand verwerfen und die Zellen im Medium resuspendieren.
Tropfen der Zellsuspension auf mit extrazellulären Matrixproteinen beschichtete Kammer-Objektträgervertiefungen geben.
Die beschichtete Oberfläche erleichtert die Befestigung von Satellitenzellen. Fügen Sie den Vertiefungen Medien hinzu.
Wachstumsfaktoren in den Medien induzieren die P
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