Differenzierung embryoider Körperzellen in neurale Vorläuferzellen mit Hilfe von Retinsäure

0 Ansichten2:25 Min. • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Beginnen Sie mit embryonalen Stammzellen, die über einer Schicht von Fibroblasten-Feederzellen kultiviert werden, die die Stammzellen in ihrem undifferenzierten Zustand halten.

Fügen Sie Trypsin-Enzyme und EDTA hinzu, um die Zell-zu-Zell-Adhäsion zu stören und die Zellen abzulösen.

Später fügen Sie ein mit Serum angereichertes Kulturmedium hinzu, um die Enzymaktivität zu stoppen, und überführen Sie die Zellsuspension in ein Röhrchen.

Zentrifugieren Sie, um die Zellen zu sammeln, entfernen Sie den Überstand und resuspendieren Sie die Zellen dann in einem Medium, das Retinsäure enthält.

Tröpfchen dieser Zellsuspension auf den Boden einer nicht klebenden Kulturschale geben.

Drehen Sie den Boden um, um hängende Tropfen zu bilden, und positionieren Sie ihn über dem Deckel der Kulturschale, der mit einem Puffer gefüllt ist, um ein Austrocknen der Tröpfchen zu verhindern.

In hängenden Tropfen bewirkt die Schwerkraft, dass sich die Zellen am Boden absetzen und sich schließlich zu dreidimensionalen Strukturen zusammenballen, die als Embryoidkörper bezeichnet werden.

Darüber hinaus absorbieren die Zellen Retinsäure, die verschiedene intrazelluläre Signalwege moduliert.

Diese Modulation stimuliert die Differenzierung von Stammzellen in neurale Vorläuferzellen mit der Fähigkeit, Neuronen zu produzieren.

Beginnen Sie mit der Bildung des Embryoidkörpers, indem Sie embryonale Stammzellen mit 0,25 % Trypsin-EDTA für 2 bis 5 Minuten bei 37 Grad Celsius und 5 % Kohlendioxid entnehmen. Geben Sie frisches Iscove's Modified Dulbecco's Medium oder IMDM mit 15 % FBS zu den ablösenden Zellen und geben Sie dann die Zellsuspension in ein 15-Milliliter-Röhrchen.

Bei 160 x g 5 Minuten bei Raumtemperatur zentrifugieren. Zählen Sie dann die Zellen mit einem Hämozytometer und bereiten Sie eine 5 x 105 Zellen pro Milliliter Suspension in IMDM mit 0,5 mikromolare Retinsäure vor. Verwenden Sie anschließend eine 8-Kanal-Pipette und 200-Mikroliter-Spitzen, um 120-Mikroliter-Tropfen pro 100-Milliliter-Petrischale zu verteilen. Drehen Sie die Schale um und füllen Sie den umgedrehten Deckel mit PBS, um ein Austrocknen der hängenden Tropfen zu verhindern. Kultur bei 37 Grad Celsius, 5% Kohlendioxid für 3 bis 4 Tage.

07:13

Anwendung von Retinsäure zu Osteozyten Kulturen aus primären Maus-Osteoblasten erhalten

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

11:05

Herstellung und Verabreichung von therapeutischen mesenchymalen Stamm- / Stroma-Zellen (MSC) Sphäroiden Primed in 3-D-Kulturen unter Xeno freien Bedingungen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

08:01

Neuronale Differenzierung von Maus embryonalen Stammzellen In vitro

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

10:47

Effiziente Ableitung von humanen neuronalen Vorläuferzellen und Neuronen aus pluripotenten humanen embryonalen Stammzellen mit Small Molecule Induction

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

01:56

Differenzierung humaner embryonaler Stammzellen in neurale Vorläuferzellen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

03:09

Generierung neuronaler Vorläuferzellen aus embryonalen Stammzellen der Maus mit der Hanging Drop-Methode

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

02:22

Eine Technik zur Erzeugung neuraler Vorläuferzellen aus embryonalen Stammzellen der Maus

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

09:04

Analyse von Retinsäure-induzierte neuronale Differenzierung von embryonalen Stammzellen der Maus in zwei und drei-dimensionale Embryoidkörpern

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

10:24

Differenzierung der embryonalen Stammzellen der Maus in kortikalen Interneuron Vorstufen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

11:17

Effiziente neuronale Differenzierung mit einzelzellischer Kultur menschlicher embryonaler Stammzellen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

Zuletzt aktualisiert: 1 August 2026